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	培训
	前言
	人工授精是利用器械采集精液，经检查处理，再用器械将精液输入到发情母羊生殖道内，以代替公、母羊自然交配的一项繁殖技术。人工授精在绒山羊选育和生产中具有重要意义，它的应用价值主要在于提高优秀种公羊的配种效能和种用价值，增加配种母羊数量。一只优秀种公羊自然交配每年配种50～70只母羊，而采用人工授精配种母羊数可达1000～2000只。精液冷冻长期保存的研究成功，使人工授精技术的应用如虎添翼优秀种畜即使在死亡之后，仍然可以应用冷冻保存的精液产生很多优秀的后代。制作细管冷冻精液的公羊都是优质高产的特级公羊，可以说百里挑一，有的是经过后裔测定千里挑一的优秀种公羊。由于公羊选择强度的加大，充分利用优秀种公羊的遗传优势，进一步提高了目标选择的精确性，实施绒长度、细度的定向选配，从而加快了育种进程。大规模地应用细管冷冻精液人工授精技术，可以不养或少养公羊，大大降低了饲养管理费用。此外，人工授精可以防止因自然交配传播的生殖疾病，提高母羊的受胎率。辽宁绒山羊原种场研制的细管冷冻精液解冻后活力好，受胎率高。应用细管冷冻精液配种是广大绒山羊饲养场、户尽快提高绒山羊的产绒量和绒毛品质的有效途径。为帮助广大用户应用好细管冷冻精液，特编小册子供参考。
	培训教材
	1 母羊发情与排卵生理 1.1 母羊生殖器官及功能母羊的生殖器官由性腺和副性腺器官构成。性腺即主性器官——卵巢，副性器官包括管状结构的生殖道和外生殖器官，生殖道包括输卵管、子宫、阴道，生殖道和卵巢一起构成内生殖器官；外生殖器官包括尿生殖前庭、阴唇和阴蒂。 1.1.1 卵巢卵巢位于腹腔肾脏的下后方，由卵巢系膜悬吊在腹腔靠近体壁处，左右各1个。卵巢呈卵圆形，约蚕豆大小。卵巢是雌性生殖细胞——卵子发生、成熟和排放的外分泌器官，又是分泌激素的内分泌器官。分布于卵巢的血管和神经随着结缔组织由卵巢门进入卵巢，并向中心分布。卵巢的中心部位叫髓质。包围髓质的部分叫皮质。皮质部分有各种发育不同阶段的卵泡和黄体。卵泡发育产生雌激素使母羊表现发情，而卵泡排卵后形成的黄体所分泌的孕激素具有助孕作用。 1.1.2 输卵管输卵管是在卵巢和子宫之间的输卵管系膜上横走的弯曲管子，管壁较薄。输卵管的腹腔端称输卵管漏斗，开口向腹腔，其边缘是呈不规则花瓣状的输卵管伞；在输卵管的子宫端有输卵管子宫口，向子宫角尖端开口。输卵管的功能是接纳卵子，并在其中受精，再将胚胎运送到子宫内着床。 1.1.3 子宫子宫是和输卵管相连的生殖器官，由两个子宫角合并而成的1个子宫体和子宫颈构成。子宫由子宫系膜悬吊于骨盆腔前部，直肠下方，膀胱上方。母羊妊娠后子宫增大，重量可达未孕时10倍以上。子宫角和子宫体的内壁有许多盘状组织，称子宫阜，是胎盘附着母体取得营养的部位。羊的子宫体比较短，子宫体的后端是以厚壁和复杂内腔构成的圆筒状子宫颈，它是子宫连接阴道之间的通道，其内腔称子宫颈管，子宫颈管与子宫腔相连的部位叫子宫颈内口，开向阴道的叫子宫颈外口。羊的子宫颈外口突出于阴道部分较短，子宫颈管腔有2～3个螺旋状皱壁。子宫的生理功能是运送精液、孕育胎儿、娩出胎儿。子宫内膜能分泌前列腺素，溶解黄体调节发情周期。子宫颈是子宫的门户，发情时颈口开放，进入精液，孕期子宫颈紧闭，防止异物进入子宫或子宫感染，保护胎儿正常发育。 1.1.4 阴道和外生殖器阴道的前方与子宫颈相连，是一个在直肠与膀胱之间向尾部走向的圆筒状器官，后方移行为阴道前庭（尿生殖前庭）。阴道是交配器官，也是分娩时的产道。阴门在尿生道前庭末端的开口部分，两侧皮肤隆起皱壁形成阴唇，在阴唇下联合的内侧有圆锥状的小突起，即阴蒂。阴蒂粘膜上有许多感觉神经末稍。 1.2 性成熟随着母羊的生长发育，生殖器官逐步发育完全，出现正常的发情周期，具有繁殖后代的能力，此时称性成熟。辽宁绒山羊的初情期一般为5～7月龄，8～9月龄达到性成熟。母羊性成熟时，身体尚未发育完善，过早配种妊娠会妨碍自身的生长发育。当母羊体重达成年体重 70%时可以配种繁殖。 1.3 发情季节辽宁绒山羊为短日照繁殖动物，即在一年四季中的光照时间变短的秋、冬季节出现发情。在繁殖季节里如果没有配种或配种未准胎，可出现几个发情周期，即绒山羊属于季节多次发情动物。在良好的饲养管理条件下，春夏季也有少量母羊出现发情。 1.4 发情在垂体促性腺激素的作用下，卵巢上的卵泡发育并分泌雌激素，随着卵泡的发育，雌激素分泌增多，雌激素作用于生殖道使之产生一系列的变化；雌激素作用于大脑皮质，使之产生性欲，允许公羊爬跨、交配等外部行为表现，把这种生理状态称为发情。正常的发情具有明显的性欲等性行为的外部表现，以及生殖器官的形态与机能的内部变化。在丘脑下部和垂体激素作用下的卵巢卵泡发育、成熟和雌激素的产生是发情的本质，而性行为等外部变化只是发情的外部现象。 1.4.1 发情征状 ①求偶表现:母羊发情时主动接近公羊，接受爬跨交配或爬跨其它母羊；②行为变化:发情母羊兴奋不安，鸣叫、摇尾、爬墙、抵门、嗅闻公羊躯体和外生殖器官，食欲减退、反刍减少，放牧时有离群现象。③生殖道变化:生殖道产生一系列变化，外阴部肿胀，阴道粘膜潮红，阴道有粘液排出，子宫颈松软开张，子宫粘膜增厚子宫腺体弯曲增多，分泌加强，输卵管蠕动加强等，这些变化均有利于配种、受精和受孕。 1.4.2 发情周期在繁殖季节里，母羊卵巢上反复出现卵泡发育、排卵、黄体形成和退化，生殖器官及整个机体都产生一系列周期性的变化，这种周期性的性活动称为性周期或发情周期。绒山羊的发情周期，即从上一次发情开始到下一次发情开始的间隔时间，平均为20天左右。 1.4.3 发情持续期指母羊开始表现发情征状起到发情征状表现结束。辽宁绒山羊发情持续期为1～2天，但在不同饲养环境条件下，不同年龄母羊的发情持续期有所差异。 1.4.4 排卵时间母羊排卵时间多发生在发情后期，即在发情开始后的35～40小时排卵。卵子保持有受精能力的时间约20小时。 2 母羊的发情与排卵控制 2.1 母羊的初情期控制通过营养手段或激素处理使母羊初情期提早到来，尽快达到性成熟和配种体重，提早配种繁殖，增加母羊终生产羔次数和产羔数量。 2.2 通过选种选配提高母羊的多胎性在繁殖力高的母羊后代中选留培育公羊，在多胎的母羊后代中选择优秀个体，通过双胎公羊配双胎母羊，可以获得多胎性能强的繁殖母羊。 2.3 母羊的发情控制发情控制包括诱发发情、同期发情和排卵控制。 2.3.1 同期发情指在短时间内（2-3天）群体母羊都出现发情。同期发情的方法： ①孕激素埋植物耳背皮下埋植法:用3mg甲基炔诺酮与硅橡胶混合后凝固成直径2～3mm，长15～20mm的硅橡胶药棒，用套管针埋植于耳背皮下16～21天，取出埋植物后2～3天出现发情。如在孕激素处理结束时注射孕马血清促性腺激素（PMSG）10～15IU/kg.w，对促进卵泡发育和同期发情有一定的作用。②孕激素阴道栓法:PRID与CIDR 中间为硬塑料或不锈钢弹簧片，弹簧片外包被着发泡的硅橡胶，硅橡胶的微孔中有孕激素，栓的前端有一速溶胶囊，内含一些孕激素与雌激素的混合物，后端系有尼龙绳。用特制的放置器将阴道栓放入阴道内，处理结束时，扯动尼龙绳将阴道栓取出。大多数母羊在撤栓后2～3天发情。③前列腺素（PG）法:用PG法使母羊同期发情，必须在发情季节，母羊处于某一发情周期中，PG处理的有效时间为发情周期的4～16天。注射氯前列烯醇的用量为0.05～0.08mg(0.5 ～0.8ml)。PG法有一次注射法和两次注射法之分。一次用药法是在发情周期4～16天的母羊有效，处理后2～3天内发情。两次用药可不考虑母羊的发情周期天数，在第一次注射后第11天进行第二次注射，两次用药法可以得到90%以上的同期发情率。同期发情的母羊，一般在观察到接受公羊爬跨后12小时进行人工授精。 2.3.2 诱发发情指诱发乏情母羊发情，其原理和方法与同期发情相同，只是不针对群体。哺育羔羊的母羊,给羔羊提早断奶,母子分开管理，有助于母羊提早发情。另外，调整光照，使母羊处于逐渐缩短光照的环境，或采用公羊刺激，均有诱发发情的作用。 2.3.3 排卵控制排卵控制包括排卵时间和排卵数量的控制。由于发情排卵是受激素的调控，应用激素制剂可以控制排卵时间，一般应用促进排卵的激素。排卵时间控制有利于开展定时人工授精而减少发情鉴定的麻烦。排卵数量的控制又包含使母羊排双卵和超数排卵。超数排卵用于胚胎移植供体母羊的胚胎生产。 2.4 诱产双羔技术母羊为双角子宫，产双胎在生理上是完全可行的，单胎品种羊产双羔等于繁殖率提高了1倍。 2.4.1 营养措施在母羊配种前1个月，补饲催情，提高母羊营养水平，保证能量和蛋白质的供给，特别是补充蛋白质饲料，可以使母羊提早发情和多排卵，诱发母羊多产羔。据报道，在一定条件下，配种前母羊体重每增加1千克，其排卵率提高2%～2.5%，产羔率提高1.5%～2%。 2.4.2 激素处理单胎品种的山羊，在正常发情到来前4天，即发情周期的第16天注射孕马血清促性腺激素（PMSG）15IU/kg.w可诱发母羊排双卵、产双羔。 2.4.3 双羔素的应用双羔素是以激素免疫中和技术原理提高母羊的排卵率，试验证明，在绵羊、辽宁绒山羊应用双羔素可使母羊产羔率平均提高20%～30%。 2.4.4 胚胎移植应用胚胎移植技术给单胎母羊移植2～3枚胚胎，使其产双羔或三羔。 3 母羊的人工授精技术 3.1 根据母羊的年龄选择适当的输精方法冻精配种时，壮龄母羊的受胎率高于幼龄母羊，子宫颈内输精的效果好于阴道输精。壮龄母羊在发情状态下，子宫颈口开张良好，子宫颈内输精可取得满意的受胎效果，一般输精深度为子宫颈口内1.0 cm～1.5cm；幼龄母羊在发情状态下，子宫颈口呈半闭或微开状态，无法进行子宫颈内输精，可进行阴道底部输精即母羊在倒立状态下，将精液输入到子宫颈外口缝隙间，靠重力作用流入子宫颈口内，输精完毕，用手突然拍打母羊后躯一下促进母羊腹肌收缩，以利精子运行。 3.2 掌握发情火候适时配种人工授精配种，特别是冻精配种掌握好母羊发情火候对提高母羊受胎率至关重要。母羊发情火候可从性行为、生殖道的生理变化以及发情时间等情况来推断。母羊的适宜发情征状为：频频摆尾、主动接近公羊并接受公羊爬跨、不断鸣叫、爬跨其它母羊或被其它母羊爬跨、食欲下降、角斗加剧。借助开膣器和光源观察阴道：可见粘液呈稍粘稠状、子宫颈口开张良好、阴道粘膜色泽为粉红色，发白的粘膜及老红色的粘膜分别表示发情不到火候或已过火。母羊的发情持续时间为母羊年龄、膘情不同而不同。壮龄羊一般为24h～36h，幼龄羊一般为5h～12h，且很不规则，老龄羊一般为12h～24h。最适宜的配种时间时母羊发情的中后期。因此，壮龄母羊应在发情后12h进行配种，幼龄羊因发情无规律可依应该发情即配，而老龄母羊应在发情8h～10h后进行配种。 3.3 配种母羊的保定人工授精操作时，母羊的保定应有利于精液流向输精部位。一般有两种姿势，如果用配种架来保定发情母羊应呈现前低后高的35° 角；如果不用保定架保定，可由1个人倒提母羊两后腿，腹部向前，两腿夹住羊的体躯，这样有利于精子向受精部位运行。保定过程中要注意避免粗暴，尽量保持母羊比较安静的状态，避免母羊挣扎，否则会造成输精人员受伤或输精枪碰伤母羊阴道造成出血而不孕。 3.4 细管冷冻精液的解冻冷冻精液的解冻方法很多，科学的解冻方法可以保持解冻精液获得最好的解冻后活力及顶体完整率，相对较长的存活时间。高温快速解冻效果好，但不易掌握。不管用什么方法，都必须注意解冻后的精液温度不超过室温。 3.5 母羊的输精母羊外阴部消毒清洗后，输精者一手拿开膣器，器柄与地面平行，倾斜插入母羊阴道内，当到达阴道底部后，再旋转90°，张开开膣器借助手电光源进行子宫颈口内输精。在抽出输精枪时，要缓慢旋转地抽出开膣器，再慢慢抽出输精枪，防止动作快造成负压导致精液回流开膣器尖更不能闭和，以免夹注粘液将精液带出，同时更要注意开膣器的温度,插入时尽量与母羊体温接近，避免过凉引起母羊努责或烫伤母羊阴道。辽宁绒山羊细管冷冻精液人工授精技术操作规程为使我省辽宁绒山羊育种工作走上一个新的台阶，进一步提高辽宁绒山羊群体的产绒量和绒毛品质，加快高产优质绒山羊的遗传进展，大力推广细管冷冻精液人工授精是一项极其重要的技术路线。为有效地发挥细管冷冻精液人工授精的作用，切实做到正确使用，科学操作，保证效果，特制定本规程。 1 配种母羊 1.1 对可繁配种母羊加强饲养管理，使之达到中上等膘情，无疫病和生殖疾患。 1.2 公、母羊分群饲养，杜绝杂交滥配。 1.3繁殖母羊群设专人管理，建立母羊繁殖档案，记录母羊配种、产羔及断奶情况。 2 试情公羊 2.1 选择体质健壮、性欲旺盛的公羊作试情公羊。 2.2 按配种母羊数的2%～3%配备试情公羊。 2.3 试情公羊最好施行输精管结扎或阴茎移位手术。带试情布试情，用过的试情布必须每天清洗干燥消毒。 3 配种准备 3.1 人工授精站（点）的操作室应向阳、温暖干燥、清洁卫生、光线良好。精液处理室要窗明台净，四壁无尘，无蚊蝇并做好消毒。 3.2人工授精器械洗涤干净没有污物，温开水冲洗干净，干燥备用。 3.3 器械消毒：金属器械（输精枪、开膣器、细管剪、镊子等）和玻璃器具（烧杯、量筒等）用蒸气灭菌30分钟。金属器械也可用酒精火焰烘烤消毒。 3.4配制的生理盐水等生理盐液可煮沸消毒。 3.5输精枪等接触精液的器械，使用前必须用灭菌生理盐水或2.9%柠檬酸钠液冲洗。 3.6输精枪用过后要及时消毒，有条件的要一羊一枪，做不到的也必须更换输精枪前端的细管套管。 3.7用过的器械及时清洗，干燥消毒备用。 4 细管冷冻精液的贮存与使用 4.1 用于贮存细管冻精的液氮罐应放在低温、干燥、通风的室内。 4.2 注意检查液氮罐的性能并及时补充液氮，使细管冻精始终浸泡在液氮之中，但不要接触罐底。 4.3 尽量减少开启液氮罐盖塞次数和每次开启的时间，防止异物和空气中的湿气进入罐内，以减少液氮消耗。 4.4 取放细管冻精要使用盛满液氮的提筒，一般提筒上提不要超过液氮罐的颈基部（距口10厘米以下）。 4.5 取放细管冻精的动作要准确、快捷，不应超过5秒钟。 5 细管冻精的解冻 5.1 用镊子从液氮提筒中夹取细管冻精，迅速投入盛有38～40℃水中（水面高度要超过细管长度）水浴解冻，当细管冻精刚变透明即取出细管中精液的温度不要超过室温。 5.2细管冻精解冻后，应及时装入输精枪，尽快输精。 6 母羊的发情鉴定 6.1 观察母羊性行为，如摇尾、频尿、外阴部肿胀及粘液性状等变化作为发情鉴定的辅助条件。 6.2 早晚试情，以接受试情公羊爬跨判定为发情。 6.3 根据发情母羊阴道粘膜色泽、粘液性状、子宫颈口开张情况，判定是否输精。 6.4若采用催情措施，如诱发发情、同期发情、排卵时间控制等，按其技术要求，决定输精时间。 7 输精 7.1 妥善保定发情母羊。 7.2 用湿毛巾擦拭外阴部,75%的酒精棉球消毒,再用灭菌生理盐水擦试,清除消毒药液。 7.3 输精员持消毒过的开膣器，涂擦灭菌生理盐水后轻轻插入阴道，开张并固定开膣器。 7.4 借助光源找到子宫颈口，将输精枪轻轻插入子宫颈口内1～1.5 厘米缓慢注入精液。 7.5根据母羊发情状态输精1～2次，间隔10～12小时。 7.6 作好配种记录，准确填写母羊号、发情配种时间、与配公羊、情期等内容。 7.7 输精标准：0.25毫升细管冻精每次输精1管，解冻后活力不低于0.3，有效精子数不少于3000万。 8 妊娠检查 8.1 观察母羊输精后30天、60天是否返情，不返情可视为妊娠。 8.2 对返情母羊作阴道检查，观察是否有生殖疾患，并分析人工授精技术操作有无失误，查找不孕原因。 8.3 加强空怀母羊饲养管理，及时补配。
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