培 训
前 言
人工授精是利用器械采集精液,经检查处理,再用器械将 精液输入到发情母羊生殖道内,以代替公、母羊自然交配的 一项繁殖技术。 人工授精在绒山羊选育和生产中具有重要意义,它的应用 价值主要在于提高优秀种公羊的配种效能和种用价值,增加 配种母羊数量。一只优秀种公羊自然交配每年配种50~70只 母羊,而采用人工授精配种母羊数可达1000~2000只。精液 冷冻长期保存的研究成功,使人工授精技术的应用如虎添翼 优秀种畜即使在死亡之后,仍然可以应用冷冻保存的精液产 生很多优秀的后代。制作细管冷冻精液的公羊都是优质高产 的特级公羊,可以说百里挑一,有的是经过后裔测定千里挑 一的优秀种公羊。由于公羊选择强度的加大,充分利用优秀 种公羊的遗传优势,进一步提高了目标选择的精确性,实施 绒长度、细度的定向选配,从而加快了育种进程。大规模地 应用细管冷冻精液人工授精技术,可以不养或少养公羊,大 大降低了饲养管理费用。此外,人工授精可以防止因自然交 配传播的生殖疾病,提高母羊的受胎率。 辽宁绒山羊原种场研制的细管冷冻精液解冻后活力好,受 胎率高。应用细管冷冻精液配种是广大绒山羊饲养场、户尽 快提高绒山羊的产绒量和绒毛品质的有效途径。为帮助广大 用户应用好细管冷冻精液,特编小册子供参考。
培 训 教 材
1 母羊发情与排卵生理 1.1 母羊生殖器官及功能 母羊的生殖器官由性腺和副性腺器官构成。性腺即主性器官——卵 巢,副性器官包括管状结构的生殖道和外生殖器官,生殖道包括输卵 管、子宫、阴道,生殖道和卵巢一起构成内生殖器官;外生殖器官包 括尿生殖前庭、阴唇和阴蒂。 1.1.1 卵巢 卵巢位于腹腔肾脏的下后方,由卵巢系膜悬吊在腹腔靠近体壁处, 左右各1个。卵巢呈卵圆形,约蚕豆大小。卵巢是雌性生殖细胞——卵 子发生、成熟和排放的外分泌器官,又是分泌激素的内分泌器官。 分布于卵巢的血管和神经随着结缔组织由卵巢门进入卵巢,并向中 心分布。卵巢的中心部位叫髓质。包围髓质的部分叫皮质。皮质部分 有各种发育不同阶段的卵泡和黄体。卵泡发育产生雌激素使母羊表现 发情,而卵泡排卵后形成的黄体所分泌的孕激素具有助孕作用。 1.1.2 输卵管 输卵管是在卵巢和子宫之间的输卵管系膜上横走的弯曲管子,管 壁较薄。输卵管的腹腔端称输卵管漏斗,开口向腹腔,其边缘是呈 不规则花瓣状的输卵管伞;在输卵管的子宫端有输卵管子宫口,向 子宫角尖端开口。 输卵管的功能是接纳卵子,并在其中受精,再将胚胎运送到子 宫内着床。 1.1.3 子宫 子宫是和输卵管相连的生殖器官,由两个子宫角合并而成的1个 子宫体和子宫颈构成。子宫由子宫系膜悬吊于骨盆腔前部,直肠下 方,膀胱上方。母羊妊娠后子宫增大,重量可达未孕时10倍以上。 子宫角和子宫体的内壁有许多盘状组织,称子宫阜,是胎盘附着母 体取得营养的部位。羊的子宫体比较短,子宫体的后端是以厚壁和 复杂内腔构成的圆筒状子宫颈,它是子宫连接阴道之间的通道,其 内腔称子宫颈管,子宫颈管与子宫腔相连的部位叫子宫颈内口,开 向阴道的叫子宫颈外口。羊的子宫颈外口突出于阴道部分较短,子 宫颈管腔有2~3个螺旋状皱壁。 子宫的生理功能是运送精液、孕育胎儿、娩出胎儿。子宫内膜 能分泌前列腺素,溶解黄体调节发情周期。子宫颈是子宫的门户, 发情时颈口开放,进入精液,孕期子宫颈紧闭,防止异物进入子宫 或子宫感染,保护胎儿正常发育。 1.1.4 阴道和外生殖器 阴道的前方与子宫颈相连,是一个在直肠与膀胱之间向尾部走向 的圆筒状器官,后方移行为阴道前庭(尿生殖前庭)。阴道是交配器 官,也是分娩时的产道。 阴门在尿生道前庭末端的开口部分,两侧皮肤隆起皱壁形成阴唇, 在阴唇下联合的内侧有圆锥状的小突起,即阴蒂。阴蒂粘膜上有许多 感觉神经末稍。 1.2 性成熟 随着母羊的生长发育,生殖器官逐步发育完全,出现正常的发情 周期,具有繁殖后代的能力,此时称性成熟。辽宁绒山羊的初情期一 般为5~7月龄,8~9月龄达到性成熟。母羊性成熟时,身体尚未发育 完善,过早配种妊娠会妨碍自身的生长发育。当母羊体重达成年体重 70%时可以配种繁殖。 1.3 发情季节 辽宁绒山羊为短日照繁殖动物,即在一年四季中的光照时间变短 的秋、冬季节出现发情。在繁殖季节里如果没有配种或配种未准胎, 可出现几个发情周期,即绒山羊属于季节多次发情动物。在良好的饲 养管理条件下,春夏季也有少量母羊出现发情。 1.4 发情 在垂体促性腺激素的作用下,卵巢上的卵泡发育并分泌雌激素, 随着卵泡的发育,雌激素分泌增多,雌激素作用于生殖道使之产生 一系列的变化; 雌激素作用于大脑皮质,使之产生性欲,允许公 羊爬跨、交配等外部行为表现,把这种生理状态称为发情。正常的 发情具有明显的性欲等性行为的外部表现,以及生殖器官的形态与 机能的内部变化。在丘脑下部和垂体激素作用下的卵巢卵泡发育、 成熟和雌激素的产生是发情的本质,而性行为等外部变化只是发情 的外部现象。 1.4.1 发情征状 ①求偶表现:母羊发情时主动接近公羊,接受爬跨交配或爬跨其 它母羊;②行为变化:发情母羊兴奋不安,鸣叫、摇尾、爬墙、抵 门、嗅闻公羊躯体和外生殖器官,食欲减退、反刍减少,放牧时有 离群现象。③生殖道变化:生殖道产生一系列变化,外阴部肿胀, 阴道粘膜潮红,阴道有粘液排出,子宫颈松软开张,子宫粘膜增厚 子宫腺体弯曲增多,分泌加强,输卵管蠕动加强等,这些变化均有 利于配种、受精和受孕。 1.4.2 发情周期 在繁殖季节里,母羊卵巢上反复出现卵泡发育、排卵、黄体形成 和退化,生殖器官及整个机体都产生一系列周期性的变化,这种周 期性的性活动称为性周期或发情周期。绒山羊的发情周期,即从上 一次发情开始到下一次发情开始的间隔时间,平均为20天左右。 1.4.3 发情持续期 指母羊开始表现发情征状起到发情征状表现结束。辽宁绒山羊发 情持续期为1~2天,但在不同饲养环境条件下,不同年龄母羊的发 情持续期有所差异。 1.4.4 排卵时间 母羊排卵时间多发生在发情后期,即在发情开始后的35~40小时 排卵。卵子保持有受精能力的时间约20小时。 2 母羊的发情与排卵控制 2.1 母羊的初情期控制 通过营养手段或激素处理使母羊初情期提早到来,尽快达到性成 熟和配种体重,提早配种繁殖,增加母羊终生产羔次数和产羔数量。 2.2 通过选种选配提高母羊的多胎性 在繁殖力高的母羊后代中选留培育公羊,在多胎的母羊后代中选 择优秀个体,通过双胎公羊配双胎母羊,可以获得多胎性能强的繁 殖母羊。 2.3 母羊的发情控制 发情控制包括诱发发情、同期发情和排卵控制。 2.3.1 同期发情 指在短时间内(2-3天)群体母羊都出现发情。同期发情的方法: ①孕激素埋植物耳背皮下埋植法:用3mg甲基炔诺酮与硅橡胶混合 后凝固成直径2~3mm,长15~20mm的硅橡胶药棒,用套管针埋植于 耳背皮下16~21天,取出埋植物后2~3天出现发情。如在孕激素处 理结束时注射孕马血清促性腺激素(PMSG)10~15IU/kg.w,对促进 卵泡发育和同期发情有一定的作用。②孕激素阴道栓法:PRID与CIDR 中间为硬塑料或不锈钢弹簧片,弹簧片外包被着发泡的硅橡胶,硅 橡胶的微孔中有孕激素,栓的前端有一速溶胶囊,内含一些孕激素 与雌激素的混合物,后端系有尼龙绳。用特制的放置器将阴道栓放 入阴道内,处理结束时,扯动尼龙绳将阴道栓取出。大多数母羊在 撤栓后2~3天发情。③前列腺素(PG)法:用PG法使母羊同期发情, 必须在发情季节,母羊处于某一发情周期中,PG处理的有效时间为 发情周期的4~16天。注射氯前列烯醇的用量为0.05~0.08mg(0.5 ~0.8ml)。PG法有一次注射法和两次注射法之分。一次用药法是在 发情周期4~16天的母羊有效,处理后2~3天内发情。两次用药可 不考虑母羊的发情周期天数,在第一次注射后第11天进行第二次注 射,两次用药法可以得到90%以上的同期发情率。 同期发情的母羊,一般在观察到接受公羊爬跨后12小时进行人工 授精。 2.3.2 诱发发情 指诱发乏情母羊发情,其原理和方法与同期发情相同,只是不针 对群体。 哺育羔羊的母羊,给羔羊提早断奶,母子分开管理,有助于母羊提 早发情。另外,调整光照,使母羊处于逐渐缩短光照的环境,或采 用公羊刺激,均有诱发发情的作用。 2.3.3 排卵控制 排卵控制包括排卵时间和排卵数量的控制。由于发情排卵是受激 素的调控,应用激素制剂可以控制排卵时间,一般应用促进排卵的 激素。排卵时间控制有利于开展定时人工授精而减少发情鉴定的麻 烦。排卵数量的控制又包含使母羊排双卵和超数排卵。超数排卵用 于胚胎移植供体母羊的胚胎生产。 2.4 诱产双羔技术 母羊为双角子宫,产双胎在生理上是完全可行的,单胎品种羊产 双羔等于繁殖率提高了1倍。 2.4.1 营养措施 在母羊配种前1个月,补饲催情,提高母羊营养水平,保证能量 和蛋白质的供给,特别是补充蛋白质饲料,可以使母羊提早发情和 多排卵,诱发母羊多产羔。据报道,在一定条件下,配种前母羊体 重每增加1千克,其排卵率提高2%~2.5%,产羔率提高1.5%~2%。 2.4.2 激素处理 单胎品种的山羊,在正常发情到来前4天,即发情周期的第16天 注射孕马血清促性腺激素(PMSG)15IU/kg.w可诱发母羊排双卵、 产双羔。 2.4.3 双羔素的应用 双羔素是以激素免疫中和技术原理提高母羊的排卵率,试验 证明,在绵羊、辽宁绒山羊应用双羔素可使母羊产羔率平均提 高20%~30%。 2.4.4 胚胎移植 应用胚胎移植技术给单胎母羊移植2~3枚胚胎,使其产双羔 或三羔。 3 母羊的人工授精技术 3.1 根据母羊的年龄选择适当的输精方法 冻精配种时,壮龄母羊的受胎率高于幼龄母羊,子宫颈内输 精的效果好于阴道输精。壮龄母羊在发情状态下,子宫颈口开张 良好,子宫颈内输精可取得满意的受胎效果,一般输精深度为子 宫颈口内1.0 cm~1.5cm;幼龄母羊在发情状态下,子宫颈口呈 半闭或微开状态,无法进行子宫颈内输精,可进行阴道底部输精 即母羊在倒立状态下,将精液输入到子宫颈外口缝隙间,靠重力 作用流入子宫颈口内,输精完毕,用手突然拍打母羊后躯一下促 进母羊腹肌收缩,以利精子运行。 3.2 掌握发情火候适时配种 人工授精配种,特别是冻精配种掌握好母羊发情火候对提高母 羊受胎率至关重要。母羊发情火候可从性行为、生殖道的生理变 化以及发情时间等情况来推断。母羊的适宜发情征状为:频频摆 尾、主动接近公羊并接受公羊爬跨、不断鸣叫、爬跨其它母羊或 被其它母羊爬跨、食欲下降、角斗加剧。借助开膣器和光源观察 阴道:可见粘液呈稍粘稠状、子宫颈口开张良好、阴道粘膜色泽 为粉红色,发白的粘膜及老红色的粘膜分别表示发情不到火候或 已过火。母羊的发情持续时间为母羊年龄、膘情不同而不同。壮 龄羊一般为24h~36h,幼龄羊一般为5h~12h,且很不规则,老龄 羊一般为12h~24h。最适宜的配种时间时母羊发情的中后期。因 此,壮龄母羊应在发情后12h进行配种,幼龄羊因发情无规律可依 应该发情即配,而老龄母羊应在发情8h~10h后进行配种。 3.3 配种母羊的保定 人工授精操作时,母羊的保定应有利于精液流向输精部位。一 般有两种姿势,如果用配种架来保定发情母羊应呈现前低后高的35° 角;如果不用保定架保定,可由1个人倒提母羊两后腿,腹部向前, 两腿夹住羊的体躯,这样有利于精子向受精部位运行。保定过程中 要注意避免粗暴,尽量保持母羊比较安静的状态,避免母羊挣扎, 否则会造成输精人员受伤或输精枪碰伤母羊阴道造成出血而不孕。 3.4 细管冷冻精液的解冻 冷冻精液的解冻方法很多,科学的解冻方法可以保持解冻精液获 得最好的解冻后活力及顶体完整率,相对较长的存活时间。高温快 速解冻效果好,但不易掌握。不管用什么方法,都必须注意解冻后的 精液温度不超过室温。 3.5 母羊的输精 母羊外阴部消毒清洗后,输精者一手拿开膣器,器柄与地面平行, 倾斜插入母羊阴道内,当到达阴道底部后,再旋转90°,张开开膣器 借助手电光源进行子宫颈口内输精。在抽出输精枪时,要缓慢旋转地 抽出开膣器,再慢慢抽出输精枪,防止动作快造成负压导致精液回流 开膣器尖更不能闭和,以免夹注粘液将精液带出,同时更要注意开膣 器的温度,插入时尽量与母羊体温接近,避免过凉引起母羊努责或烫 伤母羊阴道。 辽宁绒山羊细管冷冻精液人工授精 技术操作规程 为使我省辽宁绒山羊育种工作走上一个新的台阶,进一步提高辽宁 绒山羊群体的产绒量和绒毛品质,加快高产优质绒山羊的遗传进展, 大力推广细管冷冻精液人工授精是一项极其重要的技术路线。 为有效地发挥细管冷冻精液人工授精的作用,切实做到正确使用, 科学操作,保证效果,特制定本规程。 1 配种母羊 1.1 对可繁配种母羊加强饲养管理,使之达到中上等膘情,无疫病和 生殖疾患。 1.2 公、母羊分群饲养,杜绝杂交滥配。 1.3繁殖母羊群设专人管理,建立母羊繁殖档案,记录母羊配种、产羔 及断奶情况。 2 试情公羊 2.1 选择体质健壮、性欲旺盛的公羊作试情公羊。 2.2 按配种母羊数的2%~3%配备试情公羊。 2.3 试情公羊最好施行输精管结扎或阴茎移位手术。带试情布试情, 用过的试情布必须每天清洗干燥消毒。 3 配种准备 3.1 人工授精站(点)的操作室应向阳、温暖干燥、清洁卫生、光 线良好。精液处理室要窗明台净,四壁无尘,无蚊蝇并做好消毒。 3.2人工授精器械洗涤干净没有污物,温开水冲洗干净,干燥备用。 3.3 器械消毒:金属器械(输精枪、开膣器、细管剪、镊子等)和 玻璃器具(烧杯、量筒等)用蒸气灭菌30分钟。金属器械也可用酒 精火焰烘烤消毒。 3.4配制的生理盐水等生理盐液可煮沸消毒。 3.5输精枪等接触精液的器械,使用前必须用灭菌生理盐水或2.9%柠 檬酸钠液冲洗。 3.6输精枪用过后要及时消毒,有条件的要一羊一枪,做不到的也必 须更换输精枪前端的细管套管。 3.7用过的器械及时清洗,干燥消毒备用。 4 细管冷冻精液的贮存与使用 4.1 用于贮存细管冻精的液氮罐应放在低温、干燥、通风的室内。 4.2 注意检查液氮罐的性能并及时补充液氮,使细管冻精始终浸泡在 液氮之中,但不要接触罐底。 4.3 尽量减少开启液氮罐盖塞次数和每次开启的时间,防止异物和空 气中的湿气进入罐内,以减少液氮消耗。 4.4 取放细管冻精要使用盛满液氮的提筒,一般提筒上提不要超过液 氮罐的颈基部(距口10厘米以下)。 4.5 取放细管冻精的动作要准确、快捷,不应超过5秒钟。 5 细管冻精的解冻 5.1 用镊子从液氮提筒中夹取细管冻精,迅速投入盛有38~40℃水中 (水面高度要超过细管长度)水浴解冻,当细管冻精刚变透明即取出 细管中精液的温度不要超过室温。 5.2细管冻精解冻后,应及时装入输精枪,尽快输精。 6 母羊的发情鉴定 6.1 观察母羊性行为,如摇尾、频尿、外阴部肿胀及粘液性状等变化 作为发情鉴定的辅助条件。 6.2 早晚试情,以接受试情公羊爬跨判定为发情。 6.3 根据发情母羊阴道粘膜色泽、粘液性状、子宫颈口开张情况,判 定是否输精。 6.4若采用催情措施,如诱发发情、同期发情、排卵时间控制等,按其 技术要求,决定输精时间。 7 输精 7.1 妥善保定发情母羊。 7.2 用湿毛巾擦拭外阴部,75%的酒精棉球消毒,再用灭菌生理盐水擦 试,清除消毒药液。 7.3 输精员持消毒过的开膣器,涂擦灭菌生理盐水后轻轻插入阴道, 开张并固定开膣器。 7.4 借助光源找到子宫颈口,将输精枪轻轻插入子宫颈口内1~1.5 厘米缓慢注入精液。 7.5根据母羊发情状态输精1~2次,间隔10~12小时。 7.6 作好配种记录,准确填写母羊号、发情配种时间、与配公羊、 情期等内容。 7.7 输精标准:0.25毫升细管冻精每次输精1管,解冻后活力不 低于0.3,有效精子数不少于3000万。 8 妊娠检查 8.1 观察母羊输精后30天、60天是否返情,不返情可视为妊娠。 8.2 对返情母羊作阴道检查,观察是否有生殖疾患,并分析人 工授精技术操作有无失误,查找不孕原因。 8.3 加强空怀母羊饲养管理,及时补配。
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